細胞上清測定LDH問(wèn)題
發(fā)布時(shí)間：2014/6/5 8:32:54 瀏覽次數：8265 [字號：大 中 小] [關(guān)閉此頁(yè) 打印此頁(yè)]
測的是小鼠肝癌細胞培養上清的LDH，實(shí)驗設計時(shí)設了LDH最大釋放孔（在細胞上清對比加入2%Triton）和自然釋放孔（細胞上清對比加入空培養基）。最大釋放孔LDH測定值比自然釋放孔還低，不明白原因。
tritonX100是一種表面活性劑。具有疏水端和親水端，它可以將膜蛋白從細胞膜上解離下來(lái)，從而達到提取膜蛋白的目的，但是其沒(méi)有維持酶活的作用。過(guò)量的tritonX100反而會(huì )破壞蛋白的表面親水層而破壞蛋白結構，降低酶活。Triton X-100可以提高真核細胞細胞膜的通透性，但時(shí)常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS。老師采用的濃度是否過(guò)高，導致酶活力喪失原因。
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