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ATP含量測定的一些問(wèn)題？

發(fā)布時(shí)間：2014/2/8 10:06:21　瀏覽次數：3751　[字號：大 中 小]　 [關(guān)閉此頁(yè)　打印此頁(yè)]

每次測量都是用新的EP管，漩渦混勻器充分混勻。用分光光度計測量。比色皿都是經(jīng)過(guò)4遍純水沖洗。有5個(gè)問(wèn)題還請幫我回答一下：

1.由于我們沒(méi)有0.5cm光徑的比色皿，所以在加入終止劑后又用蒸餾水對原液進(jìn)行了4稀釋?zhuān)ㄎ舛染驮?/span>1以下了）。這樣可以嗎？

2.你們有沒(méi)有出現過(guò)測定管值小于對照管的現象。

3.體系中加入終止劑后，經(jīng)過(guò)稀釋為什么有的體系中會(huì )出現懸浮物？這是怎么回事？

4.顯色應用液的配制：顯色劑甲液是7ml/瓶，顯色劑乙液是6ml/瓶。用時(shí)將兩液混勻即可。如果這樣做的話(huà)那么總液量是不是就有13ml了？我一次實(shí)驗用不了這么多的顯色液，比如只用6.5ml。是不是就取甲液3.5ml、乙液3ml呢？

5.這是試劑盒是不是你們最新推出的產(chǎn)品。穩定嗎？

回復：

1、最終顯色液我們一般不考慮稀釋?zhuān)m然理論上都是水相，但是本身ATP含量就比較低，再稀釋更容易出現測定不出的情況。

2、查批量檢測記錄有個(gè)別樣本中ATP表達很低的情況下，會(huì )出現測定管等于或略小于對照管的現象。

3、反應體系，加終止劑后，沉淀蛋白終止反應，所以體系會(huì )出現絮狀物，混勻成渾濁，離心后有沉淀，上清澄清透亮。

4、顯色劑甲乙液，可以根據需要量吸出后配制，當然如果一次性配完后，5天內使用沒(méi)有問(wèn)題。

5、ATP含量試劑盒推出不久，由于樣本中表達不高，顯色劑靈敏度很高，出現誤差也是可能的

紅細胞測定谷胱甘肽還原酶樣本前處理？

酶液是現用現制備的，哪些是可以先制備好再存放的？存放的條件和時(shí)間？