紅細胞中MDA測定的一些問(wèn)題?
發(fā)布時(shí)間:2014/2/8 9:30:39 瀏覽次數:5130 [字號:大 中 小] [關(guān)閉此頁(yè) 打印此頁(yè)]
在使用貴公司的MDA測試盒時(shí),遇到了以下問(wèn)題:
我想測定的是紅細胞中MDA含量,采用的是抽提的方法進(jìn)行的樣本前處理。那么使用雙蒸水、無(wú)水乙醇和三氯甲烷的用量相對紅細胞的體積應是多少呢?是否就是按原說(shuō)明書(shū)上對應的全血的倍數呢?抽提離心后,有些管中的上清液表現為紅色的渾濁,應該怎么解決呢?如果加NaCl固體,那么其用量為多少呢?另外,我選取了幾個(gè)離心效果比較好,測定了最吸光度值,大概都在0.027左右,是不是吸光度有點(diǎn)低呢?我水浴時(shí)間已經(jīng)定為80分鐘。還有什么方法能夠提高吸光度值呢?是把紅細胞的用量增加嗎?我實(shí)驗室取了50微升的紅細胞。
回復:
MDA測定用提取的方法比較麻煩,一般我們直接用溶血液測定,比較方便!
當然如果要同時(shí)測定紅細胞中的SOD,可以考慮提取一份,用于不同指標的檢測!
用紅細胞測定,可以制備成溶血液后再進(jìn)行提?。ㄈ?span>50微升紅細胞,加200微升雙蒸水制成5倍溶血液,無(wú)水乙醇和氯仿的量還是按照2倍來(lái)加),如果提取的上清不透亮或者是紅色,可以加入一定量的NaCl固體(可以統一每個(gè)樣本20mg)。您測得的吸光度確實(shí)比較低,如果您不需要測定紅細胞中的SOD,我還是建議老師直接用溶血液檢測MDA!
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