測蛋清和蛋黃中溶菌酶,,TC,TG和MDA等指標樣本怎么處理?
發(fā)布時(shí)間:2014/2/7 16:57:10 瀏覽次數:3751 [字號:大 中 小] [關(guān)閉此頁(yè) 打印此頁(yè)]
要測蛋清和蛋黃中溶菌酶,,TC,TG和MDA等指標。我查到了文獻如下。
1、蛋清溶液的溶菌酶測定
蛋清用0.9%氯化鈉稀釋?zhuān)宜嵴{溶液至pH 4.5,77℃水浴10 rain后取出,靜置1 h。離心取上清,按照標準曲線(xiàn)繪制的操作測得OD絲。值,由標準曲線(xiàn)回歸方程計算蛋清溶液中溶菌酶的含量(C),再乘以稀釋倍數即為蛋清中溶菌酶的含量(P)。
其他的不知道怎么方法測?當時(shí)我買(mǎi)試劑盒的時(shí)候,說(shuō)清楚要測雞蛋的如上指標,但是發(fā)過(guò)來(lái)的試劑盒里面沒(méi)有詳細的說(shuō)明書(shū),請你盡快吧詳細的說(shuō)明書(shū)和方法發(fā)給我吧,我現在只等著(zhù),盡快吧。謝謝。。。
回復:對于您說(shuō)的這幾個(gè)指標,我們都是粗提取后進(jìn)行測定就可以了,并不需要進(jìn)行純化,
因此我們的目的只需要將我們要測的物質(zhì)提取到液體中便可。
對于TC、TG、MDA的測定,老師可統一用無(wú)水乙醇進(jìn)行提取,如準確吸取蛋黃或蛋清體積1ml,加入4倍體積的無(wú)水乙醇(由于無(wú)水乙醇易揮發(fā)可選擇5ml或10ml帶蓋的EP管中操作),旋渦混勻器上充分混勻(抽提),3500轉/分,離心10分鐘,取上清進(jìn)行測定
對于溶菌酶的提取,雖然說(shuō)溶菌酶在弱酸性條件下活力最好,其次又耐高溫,但是我們并不需要如此操作,一般推薦直接用0.1mol/L pH7~7.4磷酸鹽緩沖液或生理鹽水直接提取便可,如準確吸取蛋黃或蛋清體積1ml,加入4倍體積的緩沖液,旋渦混勻器上充分混勻(抽提),3500轉/分,離心10分鐘,取上清進(jìn)行測定
對于TC、TG的測定我之前都做過(guò),但對于MDA、LZM的測定我們之前沒(méi)有做相關(guān)的樣本,僅是推薦。
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