血涂片前處理
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1、取血 |
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① 血液標本的采集 a、毛細血管采血法 b、靜脈采血法 c、從人體采血常取自耳垂邊緣或無(wú)名指側面 |
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② 常用血液標本抗凝劑及其使用選擇a、檸檬酸鈉(枸櫞酸鈉);b、草酸鈉(乙二酸的鈉鹽);c、雙草酸鹽抗凝劑 ;d、肝素(含硫酸基團的粘多糖);e、乙二胺四乙酸(EDTA)鹽 |
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③ 第一滴血棄去不用,再由玻片一端承接約3mm直徑的血滴,將此玻片保持水平。 |
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2、涂片 |
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① 玻片準備 a、 載玻片:取新載玻片或一般將用過(guò)的載玻片先用洗衣粉水溶液煮沸2分鐘,又由流水沖洗,再經(jīng)清潔液浸泡并翻動(dòng),約過(guò)1小時(shí)或過(guò)夜,用流水反復沖洗,最后入95%酒精浸泡約1小時(shí)。取出,以潔凈布巾夾持玻片邊緣擦干備用,或者使用無(wú)菌免洗載玻片。 b、 蓋玻片:一般使用新蓋玻片。 c、 推玻片:另取一個(gè)邊緣平整的潔凈載玻片為推玻片或直接另取一個(gè)蓋玻片做推玻片。 |
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② 推片:將推玻片保持與載玻片30度角,按1的方向稍往后移與血滴接觸,即可見(jiàn)血液沿推片下緣散開(kāi),再以一定均勻的速度沿載玻片平面平穩的向2的方向滑動(dòng),至血液鋪完血膜為止。 |
③ 血涂片質(zhì)量評價(jià): 均勻、厚薄、頭體尾、邊緣、兩側(注意:血滴大,速度快、角度大 → 血膜厚) |
3、染色 |
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① 血膜要干透后才能染色,否則染色時(shí)易脫落。 |
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② 用蠟筆在血膜兩頭劃線(xiàn),平放于染色架上。 |
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③ 染色時(shí)間與染液濃度、室溫及細胞多少有關(guān),一般染液淡、染色時(shí)間長(cháng)些效果好。 |
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④ 染液不能過(guò)少,以防蒸發(fā)沉淀。 |
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⑤ 沖洗時(shí)不能先倒掉染液,應以流水沖,防染料沉著(zhù)。沖洗時(shí)間也不能長(cháng)。 |
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⑥ 染色過(guò)淡,可復染。 |
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⑦ 染色過(guò)深可用水沖洗或浸泡,還可用甲醇脫色。 |
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4、鏡檢 |
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① 打開(kāi)主電源,調整照明度。 |
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② 將染色玻片放置在載物臺上。 |
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③ 先用10×物鏡觀(guān)察,轉動(dòng)粗調手輪,見(jiàn)到血涂片影形。轉動(dòng)微調手輪即可得清晰的物像。 |
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④ 將需要使用的物鏡放入光路,用粗調、微調旋鈕調整對血涂片的焦距。 |
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⑤ 需用油鏡觀(guān)察時(shí),在血涂片的觀(guān)察部位上加滴香柏油,用粗調、微調旋鈕調整好焦距。 |
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⑥ 記錄觀(guān)察結果。 |
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⑦ 用油鏡觀(guān)察的,實(shí)驗結束,須用擦鏡紙蘸少許二甲苯,擦拭鏡頭。 |
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⑧ 關(guān)上電源開(kāi)關(guān)。 |
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